ELISA實(shí)驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)曲線吸光值、梯度挺好，但是樣本值不佳，樣本濃度太低或太高，總結(jié)原因如下：
可能原因：
1.標(biāo)曲選擇不適合
解決方法：選擇最合適的標(biāo)曲擬合。
2.樣本含量很低，低于靈敏度 無(wú)法被檢測(cè)到
解決方法：嘗試濃縮樣本或使用高敏ELISA試劑盒檢測(cè)。
3.樣本含量很高，超過(guò)標(biāo)曲
建議進(jìn)行預(yù)實(shí)驗(yàn)摸索稀釋倍數(shù)，確保樣本OD值落在標(biāo)曲范圍內(nèi)。
ELISA 實(shí)驗(yàn)結(jié)果重復(fù)性不好，可能的原因：
1.微量加樣不準(zhǔn)確
解決方法：保證微量加樣的準(zhǔn)確性和均一性，定期校準(zhǔn)移液器。
2.樣品不均一
解決方法：加樣前充分混勻樣品，取樣確保移液位置一致。
3.加樣量不一致
解決方法：樣品稀釋前應(yīng)充分混勻，盡可能使用同一移液器并裝緊吸嘴。
4.孔與孔之間的交叉污染
解決方法：孵育后取下蓋子小心操作，避免孔與孔的污染；封板膜不能重復(fù)使用。
5.邊緣效應(yīng) （外周孔顯色較中心孔深）
解決方法：孵育時(shí)盡量100 RPM旋轉(zhuǎn)混勻。
6.包被板表面遭到破壞
解決方法：洗板加樣時(shí)盡量小心，避免破壞板的包被表面。
欣博盛生物溫馨提醒您：在做ELISA實(shí)驗(yàn)時(shí)，請(qǐng)根據(jù)產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)進(jìn)行操作，如操作過(guò)程中有誤，請(qǐng)咨詢(xún)我們的技術(shù)人員，協(xié)助處理您的問(wèn)題。
