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產(chǎn)品概述
QuantiCyto® Mouse Complement Component C5a ELISA kit
Mouse
7.8 pg/ml
15.6-1000 pg/ml
雙抗體夾心法
比色法
血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、灌洗液、尿液、羊水、腹水、腦脊液、胸腔積液、組織勻漿液等
100 μl/well
3.5h
用于體外定量檢測血清、血漿或其他適用樣品中天然及重組Mouse C5a濃度
本試劑盒特異性識別天然和重組小鼠Complement Component C5a
與以下細(xì)胞因子等無明顯交叉反應(yīng)：Recombinant human C3a, Recombinant human C5a, Recombinant mouse C3d, Natural Human a2-Macroglobulin.
欣博盛QuantiCyto? ELISA試劑盒采用雙抗體夾心法：抗小鼠Complement Component C5a單抗包被于酶標(biāo)板上，標(biāo)本和標(biāo)準(zhǔn)品中的小鼠Complement Component C5a會與單抗結(jié)合，游離的成分被洗去。加入生物素化的抗小鼠ComplementComponentC5a抗體和辣根過氧化物酶標(biāo)記的親和素，生物素與親和素特異性結(jié)合；抗小鼠Complement Component C5a抗體與結(jié)合在單抗上的小鼠Complement Component C5a結(jié)合而形成免疫復(fù)合物，游離的成分被洗去。加入顯色底物，若反應(yīng)孔中有小鼠ComplementComponent C5a ，辣根過氧化物酶會使無色的顯色劑現(xiàn)藍(lán)色，加終止液變黃。在450 nm處測OD值，小鼠omplement Component C5a濃度與OD450值之間呈正比，可通過繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線求出標(biāo)本中小鼠Complement Component C5a的濃度。
本產(chǎn)品僅供科研使用、不用于臨床診斷。
產(chǎn)品性能
組分
| 名稱 | 48T | 96T |
|---|---|---|
| 抗體預(yù)包被酶標(biāo)板 | 8×6 | 8×12 |
| 凍干標(biāo)準(zhǔn)品 | 1 ng/支×2 支 | 1 ng/支×3 支 |
| 標(biāo)準(zhǔn)品&標(biāo)本通用稀釋液 | 12 ml×1 瓶 | 20 ml×1瓶 |
| 濃縮生物素化抗體 | 1 支（規(guī)格見標(biāo)簽） | 1 支（規(guī)格見標(biāo)簽） |
| 生物素化抗體稀釋液 | 10 ml×1 瓶 | 16 ml×1 瓶 |
| 濃縮酶結(jié)合物 | 1 支（規(guī)格見標(biāo)簽） | 1 支（規(guī)格見標(biāo)簽） |
| 酶結(jié)合物稀釋液 | 10 ml×1 瓶 | 16 ml×1 瓶 |
| 濃縮洗滌液20× | 25 ml×1 瓶 | 50 ml×1 瓶 |
| 顯色底物（TMB） | 6 ml×1 瓶 | 12 ml×1 瓶 |
| 反應(yīng)終止液 | 6 ml×1 瓶 | 12 ml×1 瓶 |
| 封板膠紙 | 3張 | 6張 |
| 產(chǎn)品說明書 | 1份 | 1份 |
運(yùn)輸溫度
冰袋存放說明/保質(zhì)期
| 未開封完整試劑盒 | 4℃，請?jiān)诒Ｙ|(zhì)期內(nèi)使用 | |
|---|---|---|
| 已開封試劑盒 | 抗體包被板條 | 未用完的板條放回帶拉鏈鋁箔袋封口 |
| 標(biāo)準(zhǔn)品 | 負(fù)20℃可儲存 6 個月左右，稀釋后即用即棄 | |
| 濃縮生物素化抗體 | 4℃可儲存 1 個月左右，稀釋后即用即棄 | |
| 濃縮酶結(jié)合物（避光） | ||
| 體稀釋液 | 4℃可儲存 1 個月左右 | |
| 生物素化抗體稀釋液 | ||
| 酶結(jié)合物稀釋液 | ||
| 顯色底物（避光） | ||
| 反應(yīng)終止液 | ||
| 濃縮洗滌液20× |
已開封試劑盒效期特指試劑開蓋后效期，如果僅拿出標(biāo)準(zhǔn)品置于-20℃，其他組分未啟用，效期同未開封完整試劑盒。
文件下載
實(shí)驗(yàn)所需自備器材
1. 酶標(biāo)儀(450 nm波長濾光片)。 2. 進(jìn)口品牌高精度加液器及一次性吸頭：0.5-10 ul, 2-20 ul, 20-200ul, 200-1000 ul。 3. 37 ℃恒溫箱, 雙蒸水或去離子水，坐標(biāo)紙等。
相關(guān)數(shù)據(jù)
標(biāo)準(zhǔn)曲線
| Dose（pg/ml） | Raw Data | Average | Corrected | |
|---|---|---|---|---|
| 0 | 0.077 | 0.078 | 0.078 | |
| 15.6 | 0.183 | 0.181 | 0.182 | 0.105 |
| 31.25 | 0.270 | 0.266 | 0.268 | 0.191 |
| 62.5 | 0.388 | 0.384 | 0.386 | 0.309 |
| 125 | 0.600 | 0.596 | 0.598 | 0.521 |
| 250 | 0.957 | 0.953 | 0.955 | 0.878 |
| 500 | 1.521 | 1.517 | 1.519 | 1.442 |
| 1000 | 2.364 | 2.344 | 2.354 | 2.277 |
注意：本圖僅供參考，應(yīng)以同次試驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)品所繪標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算標(biāo)本中小鼠ComplementComponentC5a的含量。
重復(fù)性
板內(nèi)，板間變異系數(shù)均<10%。
| 板內(nèi)重復(fù)性 | 板間重復(fù)性 | |||||
|---|---|---|---|---|---|---|
| 樣本 | 1 | 2 | 3 | 1 | 2 | 3 |
| 重復(fù)次數(shù) | 20 | 20 | 20 | 16 | 16 | 16 |
| 平均值（pg/ml） | 885.3 | 221.8 | 53.7 | 623.1 | 143.9 | 22.5 |
| 標(biāo)準(zhǔn)差 | 68.2 | 17.5 | 4.3 | 48.6 | 10.9 | 1.8 |
| 變異系數(shù)（%） | 7.7 | 7.9 | 8.1 | 7.8 | 7.6 | 8.0 |
科研工具箱
別稱
C5; He; C5a; Hfib2
基因ID
Gene ID: 15139(Mouse)
功能
補(bǔ)體成分5a(Complement Component 5a)是補(bǔ)體蛋白C5被C5轉(zhuǎn)化酶切割后產(chǎn)生的片段之一。它是一種促炎性肽，能激活補(bǔ)體系統(tǒng)、促進(jìn)MAC形成、吸引免疫細(xì)胞，并參與過敏反應(yīng)中的組胺釋放。C5a在先天免疫中至關(guān)重要，并與適應(yīng)性免疫相關(guān)。其過量產(chǎn)生與多種炎癥性疾病相關(guān)。 C5a是一種類過敏毒素，能導(dǎo)致內(nèi)皮細(xì)胞上粘附分子的表達(dá)增加、平滑肌收縮以及血管通透性增加。C5a des-Arg（C5a的衍生物）是一種效力較弱的類過敏毒素，C5a和C5a des-Arg都能觸發(fā)肥大細(xì)胞脫顆粒，釋放促炎分子組胺和腫瘤壞死因子α(TNF-α)。C5a還是一個有效的趨化因子，促進(jìn)感染部位補(bǔ)體和吞噬細(xì)胞的積累或?qū)⒖乖蔬f細(xì)胞招募到淋巴結(jié)。C5a在增加中性粒細(xì)胞和單核細(xì)胞向血管壁的遷移和粘附中起著關(guān)鍵作用。C5a還調(diào)節(jié)白細(xì)胞上激活與抑制性IgG Fc受體之間的平衡，從而增強(qiáng)自身免疫反應(yīng)。 作為一種關(guān)鍵的炎癥介質(zhì)，C5a是許多涉及補(bǔ)體系統(tǒng)的炎癥疾病發(fā)展進(jìn)程重的關(guān)鍵因素，如敗血癥、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎等。C5a的抑制劑可能有助于治療這些疾病。PMX53或PMX205是針對C5a受體CD88的特異性藥物，能夠減輕炎癥。C5a在敗血癥中性粒細(xì)胞功能障礙中起核心作用，抗體阻斷C5a可改善實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ秃突颊叩念A(yù)后。此外，C5a還影響中性粒細(xì)胞的吞噬和成熟，改變其對細(xì)菌的磷酸化蛋白組反應(yīng)，并通過形成中性粒細(xì)胞胞外陷阱和釋放細(xì)胞毒性組蛋白，參與ARDS和腫瘤生長轉(zhuǎn)移的病理過程。
研究領(lǐng)域
免疫學(xué)；代謝生物學(xué)
