要問科研最怕遇到的糟心事,非買到假冒科研試劑莫屬了。用假冒試劑無非導(dǎo)致兩種結(jié)果:實驗失敗or被動學(xué)術(shù)造假。ELISA試劑盒門檻較低,制假相對簡單,常有不法商家打著種屬全、指標(biāo)全、現(xiàn)貨供應(yīng)的旗號來生產(chǎn)、銷售假冒ELISA試劑盒,曾有老師吐槽“每個月都能收到好幾個從未聽過的廠商向我推銷ELISA試劑盒”。針對ELISA試劑盒真假問題,小欣從網(wǎng)上及根據(jù)自身經(jīng)驗整理了一些辨別區(qū)分真假ELISA試劑盒的方法,希望能幫助到大家。
區(qū)分真假ELISA試劑盒方法之購買前:
1.選擇正規(guī)公司
進口試劑盒盡量選擇大牌的知名公司,如賽默飛,R&D等;國產(chǎn)試劑盒一定要選擇大型正規(guī)企業(yè),比如我們欣博盛生物。將“廠家名”、“ELISA”和“假貨”等關(guān)鍵詞在網(wǎng)上搜索,有的網(wǎng)站或論壇如丁香園等會有打假曝光平臺。正規(guī)廠商的ELISA試劑盒通常有技術(shù)發(fā)明專利支撐和ISO9001國際質(zhì)量體系認(rèn)證,且廠家會定期收集整理試劑盒的文獻引用情況,購買前可向廠家索要相關(guān)材料加以核實。
2.試劑盒性能參數(shù)
向廠家索要或從其官網(wǎng)下載產(chǎn)品說明書和質(zhì)控報告,查找ELISA試劑盒的關(guān)鍵質(zhì)控性能參數(shù):準(zhǔn)確度(加標(biāo)回收率、稀釋線性)、精密度(板內(nèi)差、板間差)、靈敏度、樣本值、特異性、校準(zhǔn)。如果無法提供這些性能參數(shù)數(shù)據(jù),則說明試劑盒開發(fā)過程不夠科學(xué)嚴(yán)謹(jǐn),并未做試劑盒性能測試從而無法得到準(zhǔn)確真實的結(jié)果,也有極大可能是假貨試劑盒。
3. 不常見指標(biāo)的選擇
如需檢測不常見物種的樣本(如禽類、豬、羊等),可選擇靠譜的生物網(wǎng)站或知名ELISA試劑盒供應(yīng)商。其實,“貨比三家”有時會有一些“驚喜”,也許你會發(fā)現(xiàn):某個公司的說明書除了指標(biāo)名稱不一致,其他內(nèi)容基本一樣;某個指標(biāo),幾家公司試劑盒的性能參數(shù)完全一樣…一定要記?。宏P(guān)于網(wǎng)上宣傳有所有種屬所有指標(biāo)ELISA試劑盒的公司,那真的是再謹(jǐn)慎也不為過。
4. 所有指標(biāo)常備現(xiàn)貨
抗體并不十分穩(wěn)定,針對非熱門研究指標(biāo),廠家為保證產(chǎn)品質(zhì)量通常不會長期備現(xiàn)貨,若承諾相對冷門的ELISA試劑盒能隨時發(fā)貨,那需謹(jǐn)慎考慮是否要選擇該供應(yīng)商。
5. 向身邊人打聽生產(chǎn)ELISA試劑盒公司的口碑
一般來說,我們的師姐或者是師兄,老師們都會有購買ELISA試劑盒的經(jīng)驗,如果我們自己實在不會在網(wǎng)上挑選,可以咨詢下他們。
區(qū)分真假ELISA試劑盒方法之購買后:
1. 檢查
檢查說明書、包裝盒的質(zhì)量,通常假冒偽劣產(chǎn)品為了降低成本,印刷的質(zhì)量會比較差。其次仔細(xì)閱讀說明書,如上所示查找ELISA的性能指標(biāo)。
2.實驗
(1)利用干擾實驗即可鑒別ELISA試劑盒是否檢測目的抗原
a. 將針對試劑盒特異性的重組蛋白抗原和試劑盒中的檢測抗體配置成抗體:抗原= 1:2的混合孵育液;
b. 37℃孵育15分鐘后,代替原試劑盒中的檢測抗體;
c. 后續(xù)操作按照試劑盒說明書進行,加檢測抗體、酶復(fù)合物和底物;
d. 實驗完畢后,檢測其標(biāo)準(zhǔn)曲線,如果標(biāo)準(zhǔn)曲線良好則說明加入的目的抗原和試劑盒抗體不匹配,試劑盒檢測抗體針對的是非目的抗原,該試劑盒為假貨ELISA試劑盒;
e. 如果標(biāo)準(zhǔn)曲線無線性,則說明試劑盒檢測抗體已被目的抗原中和或干擾,影響了其實際試劑盒抗體的檢測作用,則該試劑盒檢測抗體針對的是目的抗原。
(2)如果購買了兩盒同一公司的ELISA試劑盒A和B,利用交叉實驗即可鑒別ELISA試劑盒是否造假
a. 取出購買的試劑盒A的包被板兩條;
b. 一條包被板加試劑盒A的標(biāo)準(zhǔn)品做標(biāo)準(zhǔn)曲線;
c. 另一條包被板加試劑盒B的標(biāo)準(zhǔn)品做標(biāo)準(zhǔn)曲線;
d. 后續(xù)操作按照試劑盒說明書進行,加檢測抗體、酶復(fù)合物和底物;
e. 實驗完畢后,檢測兩條標(biāo)準(zhǔn)曲線,如果兩條標(biāo)準(zhǔn)曲線一致則說明兩個ELISA試劑盒檢測的同一個指標(biāo)而非A和B,即該試劑盒為假貨ELISA試劑盒;
f. 如果兩條標(biāo)準(zhǔn)曲線不一致則說明兩個ELISA試劑盒檢測的不同指標(biāo),試劑盒A只能檢測A,不能檢測B,即該試劑盒為正常的ELISA試劑盒。