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產(chǎn)品概述
QuantiCyto® Human Pappalysin-1/PAPP-A ELISA kit
Human
0.12 ng/ml
0.24-15 ng/mL
雙抗體夾心法
比色法
血清、血漿、細胞培養(yǎng)上清液、灌洗液、尿液、羊水、腹水、腦脊液、胸腔積液、組織勻漿液等
100 μl/well
3.5h
用于體外定量檢測血清、血漿或其他適用樣品中天然及重組Human Pappalysin-1/PAPP-A濃度
本試劑盒特異性識別天然和重組人Pappalysin-1/PAPP-A。
不與人重組IGFBP-4、IGFBP-5、IGF-I、Pappalysin-2交叉反應。
欣博盛QuantiCyto?ELISA試劑盒采用雙抗體夾心法：抗人Pappalysin-1/PAPP-A單抗包被于酶標板上，標本和標準品中的人Pappalysin-1/PAPP-A會與單抗結(jié)合，游離的成分被洗去。加入生物素化的抗人Pappalysin-1/PAPP-A抗體和辣根過氧化物酶標記的親和素，生物素與親和素特異性結(jié)合；抗人Pappalysin-1/PAPP-A抗體與結(jié)合在單抗上的人Pappalysin-1/PAPP-A結(jié)合而形成免疫復合物，游離的成分被洗去。加入顯色底物，若反應孔中有人Pappalysin-1/PAPP-A，辣根過氧化物酶會使無色的顯色劑現(xiàn)藍色，加終止液變黃。在450 nm處測OD值，人Pappalysin-1/PAPP-A濃度與OD450值之間呈正比，可通過繪制標準曲線求出標本中人Pappalysin-1/PAPP-A的濃度。
本產(chǎn)品僅供科研使用、不用于臨床診斷。
產(chǎn)品性能
組分
| 名稱 | 48T | 96T |
|---|---|---|
| 抗體預包被酶標板 | 8×6 | 8×12 |
| 凍干標準品 | 以說明書為準 | 以說明書為準 |
| 標準品&標本通用稀釋液 | 12 ml×1 瓶 | 20 ml×1瓶 |
| 濃縮生物素化抗體 | 1 支（規(guī)格見標簽） | 1 支（規(guī)格見標簽） |
| 生物素化抗體稀釋液 | 10 ml×1 瓶 | 16 ml×1 瓶 |
| 濃縮酶結(jié)合物 | 1 支（規(guī)格見標簽） | 1 支（規(guī)格見標簽） |
| 酶結(jié)合物稀釋液 | 10 ml×1 瓶 | 16 ml×1 瓶 |
| 濃縮洗滌液20× | 25 ml×1 瓶 | 50 ml×1 瓶 |
| 顯色底物（TMB） | 6 ml×1 瓶 | |
| 反應終止液 | 6 ml×1 瓶 | 12 ml×1 瓶 |
| 封板膠紙 | 3張 | 6張 |
| 產(chǎn)品說明書 | 1份 | 1份 |
運輸溫度
冰袋存放說明/保質(zhì)期
| 未開封完整試劑盒 | 4℃，請在保質(zhì)期內(nèi)使用 | |
|---|---|---|
| 已開封試劑盒 | 抗體包被板條 | 未用完的板條放回帶拉鏈鋁箔袋封口 |
| 標準品 | 負20℃可儲存 6 個月左右，稀釋后即用即棄 | |
| 濃縮生物素化抗體 | 4℃可儲存 1 個月左右，稀釋后即用即棄 | |
| 濃縮酶結(jié)合物（避光） | ||
| 標準品&標本通用稀釋液 | 4℃可儲存 1 個月左右 | |
| 生物素化抗體稀釋液 | ||
| 酶結(jié)合物稀釋液 | ||
| 顯色底物（避光） | ||
| 反應終止液 | ||
| 濃縮洗滌液20× |
凍干標準品推薦于-20℃保存；若條件不足，也可保存于4℃。
已開封試劑盒效期特指試劑開蓋后效期，如果僅拿出標準品置于-20℃，其他組分未啟用，效期同未開封完整試劑盒。
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實驗所需自備器材
1. 酶標儀(450 nm波長濾光片)。 2. 進口品牌高精度加液器及一次性吸頭：0.5-10 ul, 2-20 ul, 20-200ul, 200-1000 ul。 3. 37 ℃恒溫箱, 雙蒸水或去離子水，坐標紙等。相關(guān)數(shù)據(jù)
標準曲線
| Dose（ng/ml） | Raw Data | Average | Corrected | |
|---|---|---|---|---|
| 0 | 0.064 | 0.066 | 0.065 | |
| 0.24 | 0.103 | 0.100 | 0.102 | 0.037 |
| 0.47 | 0.135 | 0.135 | 0.135 | 0.070 |
| 0.94 | 0.233 | 0.228 | 0.231 | 0.166 |
| 1.88 | 0.423 | 0.418 | 0.421 | 0.356 |
| 3.75 | 0.803 | 0.800 | 0.802 | 0.737 |
| 7.5 | 1.459 | 1.453 | 1.456 | 1.391 |
| 15 | 2.414 | 2.410 | 2.412 | 2.347 |
注意：本圖僅供參考，應以同次試驗標準品所繪標準曲線計算標本中人PAPP-A的含量。
重復性
板內(nèi)，板間變異系數(shù)均<10%。
| 板內(nèi)重復性 | 板間重復性 | |||||
|---|---|---|---|---|---|---|
| 樣本 | 1 | 2 | 3 | 1 | 2 | 3 |
| 重復次數(shù) | 10 | 10 | 10 | 8 | 8 | 8 |
| 平均值（ng/ml） | 8.12 | 2.12 | 0.77 | 7.33 | 1.65 | 0.48 |
| 標準差 | 0.60 | 0.16 | 0.06 | 0.55 | 0.13 | 0.04 |
| 變異系數(shù)（%） | 7.4 | 7.7 | 7.2 | 7.5 | 8.0 | 7.6 |
科研工具箱
別稱
PAPPA; PAPPA1; Pappalysin 1 precursor; Pappalysin-1; Pregnancy Associated Plasma Protein A
基因ID
Entrez Gene: 5069
功能
Pappalysin-1 (PAPP-A)屬于 Metzincins 家族，該家族成員包括ADAMs/ADAMTSs，MMPs，Astacins、Serralysins 以及 PAPP-A。 PPAP-A 是一種分泌的金屬蛋白酶，通常以二聚體的形式存在，每個單體由兩個次單位組成。這些酶活性的次單位在活性位置上包含一個鋅離子，在酶活性中發(fā)揮關(guān)鍵作用。A 次單位主要負責裂解特定底物，而 B 次單位則用于底物的識別和結(jié)合。這兩個次單位的協(xié)同作用，可使 PAPP-A 通過降解膠原蛋白，尤其是 I 型和 III 型膠原蛋白，產(chǎn)生胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白（Insulin-like growth factor binding protein，IGFBP）的碎片，包括 IGFBP-4 和 IGFBP-5。當 IGFBP-4 被降解時，它釋放了與其結(jié)合的胰島素樣生長因子（Insulin-like growth factor，IGF），從而增加了 IGF 的生物活性，而 IGF 的活性增加通常與胎兒的正常生長和發(fā)育相關(guān)。因此在妊娠期間，血漿中 PAPP-A 的含量增加約 150 倍，主要功能是促進胎兒發(fā)育。此外，PAPP-A 還參與了胚胎在子宮內(nèi)的植入，有助于胚胎固定在子宮內(nèi)膜上并繼續(xù)發(fā)育。 PAPP-A 在妊娠早期的降低是唐氏綜合征的主要標志。低水平的PAPP-A 也可表明胎盤存在問題，可能導致并發(fā)癥，如宮內(nèi)生長受限、妊娠毒血癥、胎盤早期剝離、早產(chǎn)甚至死產(chǎn)。因此，PAPP-A 也被用作產(chǎn)前篩查的生物標志物。
研究領域
心血管生物學;細胞生物學
