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產(chǎn)品概述
QuantiCyto® Rat TNF-α ELISA kit
Rat
31.25pg/ml
62.5-4000pg/ml
雙抗體夾心法 / Sandwich
比色法 / Colorimetric
血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、灌洗液、尿液、羊水、腹水、腦脊液、胸腔積液、組織勻漿液等
100 μl/well
3.5h
用于檢測(cè)血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、灌洗液、尿液、羊水、腹水、腦脊液、胸腔積液、組織勻漿液等多種類型樣本中天然和重組大鼠TNF-α濃度
本試劑盒特異性識(shí)別天然和重組Rat TNF-α
與以下細(xì)胞因子等無明顯交叉反應(yīng)：Human TNF-α，TNF-β，TNF RI，TNF RII；Mouse IL-2，IL-4，IL-6，IL-10，TNF RI，TNF RII；Rat IL-1β，IL-2，IL-4，IL-6，IL-10，IFN-γ，PDGF-BB
欣博盛 QuantiCyto? ELISA試劑盒采用雙抗體夾心法：抗Rat TNF-α單抗包被于酶標(biāo)板上，標(biāo)本和標(biāo)準(zhǔn)品中的Rat TNF-α?xí)c單抗結(jié)合，游離的成分被洗去。加入酶標(biāo)抗體，抗Rat TNF-α抗體與結(jié)合在單抗上的Rat TNF-α結(jié)合而形成免疫復(fù)合物，游離的成分被洗去。加入顯色底物，若反應(yīng)孔中有Rat TNF-α，辣根過氧化物酶會(huì)使無色的顯色劑現(xiàn)藍(lán)色，加終止液變黃。在450 nm處測(cè)OD值，Rat TNF-α濃度與OD450值之間呈正比，可通過繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線求出標(biāo)本中Rat TNF-α的濃度。
本產(chǎn)品僅供科研使用、不用于臨床診斷。
產(chǎn)品性能
組分
| 名稱 | 48T | 96T |
|---|---|---|
| 抗體預(yù)包被酶標(biāo)板 | 8×6 | 8×12 |
| 凍干標(biāo)準(zhǔn)品 | 3.2 ng/支×2 支 | 3.2 ng/支×3 支 |
| 標(biāo)準(zhǔn)品&標(biāo)本通用稀釋液 | 12 ml×1 瓶 | 20 ml×1瓶 |
| 濃縮生物素化抗體 | 1 支（規(guī)格見標(biāo)簽） | 1 支（規(guī)格見標(biāo)簽） |
| 生物素化抗體稀釋液 | 10 ml×1 瓶 | 16 ml×1 瓶 |
| 濃縮酶結(jié)合物 | 1 支（規(guī)格見標(biāo)簽） | 1 支（規(guī)格見標(biāo)簽） |
| 酶結(jié)合物稀釋液 | 10 ml×1 瓶 | 16 ml×1 瓶 |
| 濃縮洗滌液20× | 25 ml×1 瓶 | 50 ml×1 瓶 |
| 顯色底物（TMB） | 6 ml×1 瓶 | 12 ml×1 瓶 |
| 反應(yīng)終止液 | 6 ml×1 瓶 | 12 ml×1 瓶 |
| 封板膠紙 | 3張 | 6張 |
| 產(chǎn)品說明書 | 1份 | 1份 |
運(yùn)輸溫度
冰袋存放說明/保質(zhì)期
| 未開封完整試劑盒 | 4℃，請(qǐng)?jiān)诒Ｙ|(zhì)期內(nèi)使用 | |
|---|---|---|
| 已開封試劑盒 | 抗體包被板條 | 未用完的板條放回帶拉鏈鋁箔袋封口 |
| 標(biāo)準(zhǔn)品 | 負(fù)20℃可儲(chǔ)存 6 個(gè)月左右，稀釋后即用即棄 | |
| 濃縮生物素化抗體 | 4℃可儲(chǔ)存 1 個(gè)月左右，稀釋后即用即棄 | |
| 濃縮酶結(jié)合物（避光） | ||
| 標(biāo)準(zhǔn)品&標(biāo)本通用稀釋液 | 4℃可儲(chǔ)存 1 個(gè)月左右 | |
| 生物素化抗體稀釋液 | ||
| 酶結(jié)合物稀釋液 | ||
| 顯色底物（避光） | ||
| 反應(yīng)終止液 | ||
| 濃縮洗滌液20× |
凍干標(biāo)準(zhǔn)品推薦于-20℃保存；若條件不足，也可保存于4℃。
已開封試劑盒效期特指試劑開蓋后效期，如果僅拿出標(biāo)準(zhǔn)品置于-20℃，其他組分未啟用，效期同未開封完整試劑盒。
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實(shí)驗(yàn)所需自備器材
1. 酶標(biāo)儀(450 nm波長(zhǎng)濾光片)。 2. 進(jìn)口品牌高精度加液器及一次性吸頭：0.5-10 ul, 2-20 ul, 20-200ul, 200-1000 ul。 3. 37 ℃恒溫箱, 雙蒸水或去離子水，坐標(biāo)紙等。相關(guān)數(shù)據(jù)
標(biāo)準(zhǔn)曲線
| Dose（pg/ml） | Raw Data | Average | Corrected | |
|---|---|---|---|---|
| 0 | 0.075 | 0.076 | 0.076 | |
| 62.5 | 0.100 | 0.099 | 0.100 | 0.024 |
| 125 | 0.129 | 0.133 | 0.131 | 0.055 |
| 250 | 0.211 | 0.222 | 0.217 | 0.141 |
| 500 | 0.364 | 0.400 | 0.382 | 0.306 |
| 1000 | 0.725 | 0.758 | 0.742 |
0.666 |
| 2000 | 1.275 | 1.448 | 1.362 | 1.286 |
| 4000 | 2.135 | 2.237 | 2.186 | 2.110 |
注意：本圖僅供參考，應(yīng)以同次試驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)品所繪標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算標(biāo)本中大鼠TNF-α的含量。
重復(fù)性
板內(nèi)，板間變異系數(shù)均<10%。
| 板內(nèi)重復(fù)性 | 板間重復(fù)性 | |||||
|---|---|---|---|---|---|---|
| 樣本 | 1 | 2 | 3 | 1 | 2 | 3 |
| 重復(fù)次數(shù) | 10 | 10 | 10 | 8 | 8 | 8 |
| 平均值（pg/ml） | 2308.7 | 973.5 | 238.2 | 2167.3 | 916.7 | 213.8 |
| 標(biāo)準(zhǔn)差 | 187.00 | 73.99 | 17.39 | 171.22 | 66.92 | 15.18 |
| 變異系數(shù)（%） | 8.1 | 7.6 | 7.3 | 7.9 | 7.3 | 7.1 |
科研工具箱
別稱
Tnfa; RATTNF; TNF-alpha
基因ID
Gene ID: 24835
功能
腫瘤壞死因子(Tumor Necrosis Factor alpha, TNF-α)也稱為惡病質(zhì)素(cachectin)和TNFSF1A，是一種多效性的細(xì)胞因子，在炎癥、細(xì)胞凋亡和免疫系統(tǒng)發(fā)育過程中發(fā)揮重要作用。TNF-α可由多種免疫細(xì)胞和上皮細(xì)胞產(chǎn)生。大鼠TNF-α由35個(gè)氨基酸氨基的胞內(nèi)結(jié)構(gòu)域、21個(gè)氨基酸殘基的跨膜區(qū)以及179個(gè)氨基酸組成的胞外結(jié)構(gòu)域組成。 其中，胞外結(jié)構(gòu)域與小鼠具有94%的氨基酸序列同一性，與牛、犬、馬、貓、人、豬和恒河猴具有69-76%的序列同一性。該26kDa的II型跨膜蛋白在胞內(nèi)組裝形成非共價(jià)連接的同源三聚體。復(fù)合體的結(jié)合可誘導(dǎo)反向信號(hào)傳導(dǎo)，促進(jìn)淋巴細(xì)胞共刺激，減弱單核細(xì)胞的應(yīng)答。 膜結(jié)合型TNF-α經(jīng)TACE/ADAM17裂解可釋放出55kDa的可溶性TNF-α三聚體。TNF-α與泛表達(dá)的TNF RI和造血細(xì)胞限制性的TNFRII結(jié)合。TNF RI和TNF RII均以同源三聚體形式表達(dá)。TNF-α通過控制細(xì)胞凋亡從而調(diào)節(jié)淋巴組織的發(fā)育。TNF-α還可通過誘導(dǎo)活化血管內(nèi)皮細(xì)胞和巨噬細(xì)胞促進(jìn)炎癥反應(yīng)應(yīng)答。TNF-α是多種炎癥性疾病發(fā)展中的一個(gè)關(guān)鍵性細(xì)胞因子，國(guó)外大量報(bào)道提示TNF-α可能是胰島素抵抗發(fā)病機(jī)制中的重要中介環(huán)節(jié)。體內(nèi)及體外試驗(yàn)均證明TNF-α可干擾周圍組織胰島素作用致胰島素抵抗。
研究領(lǐng)域
免疫學(xué);信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo);干細(xì)胞與再生醫(yī)學(xué);微生物學(xué);癌癥生物學(xué);心血管生物學(xué);神經(jīng)科學(xué);代謝生物學(xué);
文獻(xiàn)引用（275）
Li Q, X. A., Qi F, et al. Synergistic effects of combined vaccination with BCG and influenza vaccines on spatial cognition and hippocampal plasticity in rats. Brain Research Bulletin 24 April 2019 (2019). Link
Li Q, Q. F., Yang J, et al. Neonatal vaccination with bacillus Calmette–Guérin and hepatitis B vaccines modulates hippocampal synaptic plasticity in rats. Journal of Neuroimmunology September 02, 2015 (2015). Link
Zhong C, W. Q., He Y, et al. Maternal supplementation of human milk derived Lactiplantibacillus plantarum WLPL04 affects the immunity and gut microbiota of offspring rats. Food & Function 9 May 2023 (2023). Link
Lang Q, Y. X., Xueguang Z, et al. ETA-mediated anti-TNF-α therapy ameliorates the phenotype of PCOS model induced by letrozole. . PloS one 6 June 2019 (2019). Link
Dai Tian, Y. Q., Yongkun Zhan, Xiaobo Li, Xiuling Zhi, Xinhong Wang, Lianhua Yin and Yanxia Ning. Overexpression of steroidogenic acute regulatory protein in rat aortic endothelial cells attenuates palmitic acid-induced inflammation and reduction in nitri Link
客戶評(píng)鑒
第四軍醫(yī)大學(xué)-付老師
重慶大學(xué)-王老師
軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院二所七室-
Synergistic Effects of Salvianolic Acid B and Puerarin on Cerebral Ischemia Reperfusion Injury
