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產(chǎn)品概述
QuantiCyto® Human/Mouse/Rat HMGB1 ELISA kit
Human/Mouse/Rat
0.78 ng/ml
1.56-100 ng/ml
雙抗體夾心法
比色法
血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、灌洗液、尿液、羊水、腹水、腦脊液、胸腔積液、組織勻漿液等
100 μl/well
3.5h
用于體外定量檢測(cè)血清、血漿或其他適用樣品中天然及重組Human/Mouse/Rat HMGB1濃度
本試劑盒特異性識(shí)別天然和重組人/小鼠/大鼠HMGB1。
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欣博盛QuantiCyto? ELISA試劑盒采用雙抗體夾心法：抗人/小鼠/大鼠HMGB1單抗包被于酶標(biāo)板上，標(biāo)本和標(biāo)準(zhǔn)品中的人/小鼠/大鼠HMGB1會(huì)與單抗結(jié)合，游離的成分被洗去。加入生物素化的抗人/小鼠/大鼠HMGB1抗體和辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記的親和素，生物素與親和素特異性結(jié)合；抗人/小鼠/大鼠HMGB1抗體與結(jié)合在單抗上的人/小鼠/大鼠HMGB1結(jié)合而形成免疫復(fù)合物，游離的成分被洗去。加入顯色底物，若反應(yīng)孔中有人/小鼠/大鼠HMGB1，辣根過(guò)氧化物酶會(huì)使無(wú)色的顯色劑現(xiàn)藍(lán)色，加終止液變黃。在450nm處測(cè)OD值，人/小鼠/大鼠HMGB1濃度與OD450值之間呈正比，可通過(guò)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線求出標(biāo)本中人/小鼠/大鼠HMGB1的濃度。
本產(chǎn)品僅供科研使用、不用于臨床診斷
產(chǎn)品性能
組分
| 名稱 | 48T | 96T |
|---|---|---|
| 抗體預(yù)包被酶標(biāo)板 | 8×6 | 8×12 |
| 凍干標(biāo)準(zhǔn)品 | 50 ng/支×2 支 | 50 ng/支×3 支 |
| 標(biāo)準(zhǔn)品&標(biāo)本通用稀釋液 | 12 ml×1 瓶 | 20 ml×1瓶 |
| 濃縮生物素化抗體 | 1 支（規(guī)格見(jiàn)標(biāo)簽） | 1 支（規(guī)格見(jiàn)標(biāo)簽） |
| 生物素化抗體稀釋液 | 10 ml×1 瓶 | 16 ml×1 瓶 |
| 濃縮酶結(jié)合物 | 1 支（規(guī)格見(jiàn)標(biāo)簽） | 1 支（規(guī)格見(jiàn)標(biāo)簽） |
| 酶結(jié)合物稀釋液 | 10 ml×1 瓶 | 16 ml×1 瓶 |
| 濃縮洗滌液20× | 25 ml×1 瓶 | 50 ml×1 瓶 |
| 顯色底物（TMB） | 6 ml×1 瓶 | 12 ml×1 瓶 |
| 反應(yīng)終止液 | 6 ml×1 瓶 | 12 ml×1 瓶 |
| 封板膠紙 | 3張 | 6張 |
| 產(chǎn)品說(shuō)明書(shū) | 1份 | 1份 |
運(yùn)輸溫度
冰袋存放說(shuō)明/保質(zhì)期
| 未開(kāi)封完整試劑盒 | 4℃，請(qǐng)?jiān)诒Ｙ|(zhì)期內(nèi)使用 | |
|---|---|---|
| 已開(kāi)封試劑盒 | 抗體包被板條 | 未用完的板條放回帶拉鏈鋁箔袋封口 |
| 標(biāo)準(zhǔn)品 | 負(fù)20℃可儲(chǔ)存 6 個(gè)月左右，稀釋后即用即棄 | |
| 濃縮生物素化抗體 | 4℃可儲(chǔ)存 1 個(gè)月左右，稀釋后即用即棄 | |
| 濃縮酶結(jié)合物（避光） | ||
| 體稀釋液 | 4℃可儲(chǔ)存 1 個(gè)月左右 | |
| 生物素化抗體稀釋液 | ||
| 酶結(jié)合物稀釋液 | ||
| 顯色底物（避光） | ||
| 反應(yīng)終止液 | ||
| 濃縮洗滌液20× |
已開(kāi)封試劑盒效期特指試劑開(kāi)蓋后效期，如果僅拿出標(biāo)準(zhǔn)品置于-20℃，其他組分未啟用，效期同未開(kāi)封完整試劑盒。
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實(shí)驗(yàn)所需自備器材
1. 酶標(biāo)儀(450 nm波長(zhǎng)濾光片)。 2. 進(jìn)口品牌高精度加液器及一次性吸頭：0.5-10 ul, 2-20 ul, 20-200ul, 200-1000 ul。 3. 37 ℃恒溫箱, 雙蒸水或去離子水，坐標(biāo)紙等。
相關(guān)數(shù)據(jù)
標(biāo)準(zhǔn)曲線
| Dose（ng/ml） | Raw Data | Average | Corrected | |
|---|---|---|---|---|
| 0 | 0.074 | 0.075 | 0.075 | |
| 1.56 | 0.115 | 0.115 | 0.115 | 0.041 |
| 3.13 | 0.157 | 0.153 | 0.155 | 0.081 |
| 6.25 | 0.252 | 0.250 | 0.251 | 0.177 |
| 12.5 | 0.446 | 0.437 | 0.442 | 0.367 |
| 25 | 0.803 | 0.798 | 0.801 | 0.726 |
| 50 | 1.421 | 1.415 | 1.418 | 1.344 |
| 100 | 2.340 | 2.328 | 2.334 | 2.260 |
注意：本圖僅供參考，應(yīng)以同次試驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)品所繪標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算標(biāo)本中人/小鼠/大鼠HMGB1的含量。
重復(fù)性
板內(nèi)，板間變異系數(shù)均<10%。
| 板內(nèi)重復(fù)性 | 板間重復(fù)性 | |||||
|---|---|---|---|---|---|---|
| 樣本 | 1 | 2 | 3 | 1 | 2 | 3 |
| 重復(fù)次數(shù) | 10 | 10 | 10 | 10 | 10 | 10 |
| 平均值（ng/ml） | 75.9 | 20.7 | 6.1 | 68.1 | 14.5 | 3.8 |
| 標(biāo)準(zhǔn)差 | 5.8 | 1.6 | 0.5 | 5.5 | 1.1 | 0.3 |
| 變異系數(shù)（%） | 7.7 | 7.9 | 7.5 | 8.1 | 7.8 | 7.6 |
科研工具箱
別稱
High mobility group box 1; HMGB1; Amphoterin; HMG-1
基因ID
GeneID: 3146 Human HMGB1; Swiss-port # P09429 Human High mobility group protein B1
功能
高遷移率族蛋白B1(High mobility group box 1, HMGB1)于1973年首次在牛胸腺中被發(fā)現(xiàn)，又稱為Amphoterin或high-mobility group protein 1(HMG-1)，是高遷移率族蛋白家族的非組蛋白染色體蛋白的一員。人類HMGB1是一種25 kDa的單鏈蛋白，包含兩個(gè)帶正電的球狀DNA結(jié)合結(jié)構(gòu)域（A box和B box），和一個(gè)僅包含天冬氨酸和谷氨酸殘基的帶負(fù)電C末端區(qū)域（酸性尾部）。A box和B box都由三個(gè)α-螺旋結(jié)構(gòu)組成，這些結(jié)構(gòu)可與DNA進(jìn)行非特異性相互作用。 HMGB1在幾乎所有細(xì)胞中都有高水平表達(dá)，其一級(jí)結(jié)構(gòu)具有進(jìn)化保守性，它最初作為一種可以彎曲DNA的核蛋白被發(fā)現(xiàn)，這種彎曲能夠穩(wěn)定核小體的形成，并在DNA結(jié)合蛋白募集時(shí)調(diào)節(jié)選擇基因的表達(dá)，因此被描述為具有轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)特性的非組蛋白核蛋白。HMGB1還可以在細(xì)胞外發(fā)揮作用，既可以作為促進(jìn)單核細(xì)胞遷移和細(xì)胞因子分泌的炎癥介質(zhì)，也可以作為T(mén)細(xì)胞-樹(shù)突狀細(xì)胞相互作用的介質(zhì)，參與多種炎癥和自身免疫性疾病的發(fā)病機(jī)制。當(dāng)免疫細(xì)胞應(yīng)對(duì)內(nèi)源性或外源性刺激（如內(nèi)毒素、白介素，或缺氧等），HMGB1可以被主動(dòng)釋放。同時(shí)，壞死或受損細(xì)胞可以被動(dòng)釋放HMGB1。此外，巨噬細(xì)胞吞噬凋亡細(xì)胞可導(dǎo)致HMGB1進(jìn)一步釋放。HMGB1在其信號(hào)級(jí)聯(lián)過(guò)程中可利用多種膜受體。在眾多HMGB1細(xì)胞外受體中，晚期糖基化終產(chǎn)物受體(Receptor for advanced glycosylation end products，RAGE)和toll樣受體4 (Toll-like receptor 4，TLR4)是被廣泛研究和報(bào)道的受體。HMGB1與TLR4和RAGE等受體結(jié)合，通過(guò)激活核因子κB(nuclear factor kappa-B，NF-κB)和絲裂原活化蛋白(Mitogen-activated protein kinase，MAP)激酶信號(hào)通路，導(dǎo)致促炎細(xì)胞分泌細(xì)胞因子增加。HMGB1被廣泛認(rèn)為是一種多功能的危險(xiǎn)信號(hào)蛋白，參與多種疾病的發(fā)病機(jī)制，包括動(dòng)脈粥樣硬化、敗血癥、癌癥、神經(jīng)退行性疾病和自身免疫性疾病等。
研究領(lǐng)域
免疫學(xué);心血管生物學(xué);信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo);癌癥生物學(xué);
