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產(chǎn)品概述
QuantiCyto® Human MIF ELISA kit
Human
31.3 pg/ml
62.5-4000 pg/ml
雙抗體夾心法
比色法
血清、血漿、細胞培養(yǎng)上清液、灌洗液、尿液、羊水、腹水、腦脊液、胸腔積液、組織勻漿液等
100 μl/well
3.5h
用于體外定量檢測血清、血漿或其他適用樣品中天然及重組Human MIF濃度
本試劑盒特異性識別天然和重組人MIF。
與重組人IFN-γ、IL-4，重組小鼠MIF因子無明顯交叉反應。
欣博盛QuantiCyto? ELISA試劑盒采用雙抗體夾心法：抗人MIF單抗包被于酶標板上，標本和標準品中的人MIF會與單抗結(jié)合，游離的成分被洗去。加入生物素化的抗人MIF抗體和辣根過氧化物酶標記的親和素，生物素與親和素特異性結(jié)合；抗人MIF抗體與結(jié)合在單抗上的人MIF結(jié)合而形成免疫復合物，游離的成分被洗去。加入顯色底物，若反應孔中有人MIF，辣根過氧化物酶會使無色的顯色劑現(xiàn)藍色，加終止液變黃。在450 nm處測OD值，人MIF濃度與OD450值之間呈正比，可通過繪制標準曲線求出標本中人MIF的濃度。
本產(chǎn)品僅供科研使用、不用于臨床診斷
產(chǎn)品性能
組分
| 名稱 | 48T | 96T |
|---|---|---|
| 抗體預包被酶標板 | 8×6 | 8×12 |
| 凍干標準品 | 2 ng/支×2 支 | 2 ng/支×3 支 |
| 標準品&標本通用稀釋液 | 12 ml×1 瓶 | 20 ml×1瓶 |
| 濃縮生物素化抗體 | 1 支（規(guī)格見標簽） | 1 支（規(guī)格見標簽） |
| 生物素化抗體稀釋液 | 10 ml×1 瓶 | 16 ml×1 瓶 |
| 濃縮酶結(jié)合物 | 1 支（規(guī)格見標簽） | 1 支（規(guī)格見標簽） |
| 酶結(jié)合物稀釋液 | 10 ml×1 瓶 | 16 ml×1 瓶 |
| 濃縮洗滌液20× | 25 ml×1 瓶 | 50 ml×1 瓶 |
| 顯色底物（TMB） | 6 ml×1 瓶 | 12 ml×1 瓶 |
| 反應終止液 | 6 ml×1 瓶 | 12 ml×1 瓶 |
| 封板膠紙 | 3張 | 6張 |
| 產(chǎn)品說明書 | 1份 | 1份 |
運輸溫度
冰袋存放說明/保質(zhì)期
| 未開封完整試劑盒 | 4℃，請在保質(zhì)期內(nèi)使用 | |
|---|---|---|
| 已開封試劑盒 | 抗體包被板條 | 未用完的板條放回帶拉鏈鋁箔袋封口 |
| 標準品 | 負20℃可儲存 6 個月左右，稀釋后即用即棄 | |
| 濃縮生物素化抗體 | 4℃可儲存 1 個月左右，稀釋后即用即棄 | |
| 濃縮酶結(jié)合物（避光） | ||
| 體稀釋液 | 4℃可儲存 1 個月左右 | |
| 生物素化抗體稀釋液 | ||
| 酶結(jié)合物稀釋液 | ||
| 顯色底物（避光） | ||
| 反應終止液 | ||
| 濃縮洗滌液20× |
已開封試劑盒效期特指試劑開蓋后效期，如果僅拿出標準品置于-20℃，其他組分未啟用，效期同未開封完整試劑盒。
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實驗所需自備器材
1. 酶標儀(450 nm波長濾光片)。 2. 進口品牌高精度加液器及一次性吸頭：0.5-10 ul, 2-20 ul, 20-200ul, 200-1000 ul。 3. 37 ℃恒溫箱, 雙蒸水或去離子水，坐標紙等。
相關(guān)數(shù)據(jù)
標準曲線
| Dose（pg/ml） | Raw Data | Average | Corrected | |
|---|---|---|---|---|
| 0 | 0.070 | 0.071 | 0.071 | |
| 62.5 | 0.131 | 0.127 | 0.129 | 0.059 |
| 125 | 0.179 | 0.174 | 0.177 | 0.106 |
| 250 | 0.280 | 0.276 | 0.278 | 0.208 |
| 500 | 0.460 | 0.450 | 0.455 | 0.385 |
| 1000 | 0.800 | 0.795 | 0.798 | 0.727 |
| 2000 | 1.381 | 1.367 | 1.374 | 1.304 |
| 4000 | 2.392 | 2.374 | 2.383 | 2.313 |
注意：本圖僅供參考，應以同次試驗標準品所繪標準曲線計算標本中人MIF的含量。
重復性
板內(nèi)，板間變異系數(shù)均<10%。
| 板內(nèi)重復性 | 板間重復性 | |||||
|---|---|---|---|---|---|---|
| 樣本 | 1 | 2 | 3 | 1 | 2 | 3 |
| 重復次數(shù) | 10 | 10 | 10 | 10 | 10 | 10 |
| 平均值（pg/ml） | 3502.4 | 802.9 | 201.3 | 2746.2 | 622.7 | 155.1 |
| 標準差 | 266.2 | 64.2 | 15.7 | 216.9 | 47.9 | 11.6 |
| 變異系數(shù)（%） | 7.6 | 8.0 | 7.8 | 7.9 | 7.7 | 7.5 |
科研工具箱
別稱
Macrophage migration inhibitory factor; glycosylation-inhibiting factor; GIF; GLIF; MMIF
基因ID
Gene ID: 4282；Ensembl:ENSG00000240972；MIM:153620；AllianceGenome:HGNC:7097
功能
巨噬細胞移動抑制因子（macrophage migration inhibitory factor, MIF），也稱為糖基化抑制因子（glycosylation-inhibiting factor, GIF）、L-多巴鉻異構(gòu)酶或苯丙酮酸互變酶，是由MIF基因編碼的蛋白質(zhì)。MIF由三個相同的亞基組裝成三聚體，每個單體包含兩條反平行的α-螺旋和一個由四條β-鏈組成的β-折疊片，單體環(huán)繞著一個具有三重旋轉(zhuǎn)對稱性的中央通道分布。CD74是MIF的表面受體，細菌抗原刺激白細胞將MIF釋放到血液中，循環(huán)中的MIF與其他免疫細胞上的CD74結(jié)合，觸發(fā)急性免疫反應。因此，MIF被歸類為炎癥細胞因子。MIF與CD74結(jié)合，誘導CD74的磷酸化并募集CD44，進而激活非受體酪氨酸激酶，最終導致細胞外信號調(diào)節(jié)激酶（extracellular signal-regulated kinase, ERK）磷酸化。除了ERK，CD74的刺激還激活其他信號通路，如PI3K-Akt、NF-κB和AMP活化蛋白激酶（AMP-activated protein kinase, AMPK）通路。除了CD74，MIF也與趨化因子受體4(C-X-C chemokine receptor type 4, CXCR4)、COP9信號體亞基5(COP9 constitutive photomorphogenic homolog subunit 5, COPS5)等分子相互作用。MIF與CXCR4的相互作用可能影響免疫細胞的遷移和定位，從而調(diào)節(jié)免疫反應；COPS5參與多種細胞過程的調(diào)節(jié)，包括蛋白質(zhì)降解和細胞周期控制，MIF與COPS5的相互作用可能在這些過程中發(fā)揮調(diào)節(jié)作用。此外，糖皮質(zhì)激素也刺激白細胞釋放MIF，從而部分抵消糖皮質(zhì)激素對免疫系統(tǒng)的抑制作用。MIF作為炎性趨化因子，在許多疾病如代謝性疾病（如動脈粥樣硬化）、自身免疫?。ㄈ珙愶L濕關(guān)節(jié)炎）、癌癥、傳染性疾?。ㄈ缒摱景Y）以及傷口愈合中都有非常重要的作用，因此可作為以上疾病的生物標記物或用于研究新的治療方案。
研究領(lǐng)域
心血管生物學;免疫學;癌癥生物學
