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產(chǎn)品概述
QuantiCyto® Human MCP-3/CCL7 ELISA kit
Human
0.078ng/ml
0.156-20ng/ml
雙抗體夾心法
比色法
血清、血漿、細胞培養(yǎng)上清液、灌洗液、尿液、羊水、腹水、腦脊液、胸腔積液、組織勻漿液等
100 μl/well
3.5h
用于體外定量檢測血清、血漿或其他適用樣品中天然及部分重組Human MCP-3 濃度
本試劑盒特異性識別天然和重組Human MCP-3
與以下細胞因子無明顯交叉反應(yīng)：Human MCP-1, MIP-1α , MCP-2 MIP-1β, MCP-4, MIP-3β, RANTES; Mouse MCP-1, MIP-1α, MIP-1β
欣博盛 QuantiCyto? ELISA試劑盒采用雙抗體夾心法：抗Human MCP-3 單抗包被于酶標板上，標本和標準品中的Human MCP-3 會與單抗結(jié)合，游離的成分被洗去。加入生物素化的抗Human MCP-3 抗體和辣根過氧化物酶標記的親和素，生物素與親和素特異性結(jié)合；抗Human MCP-3 抗體與結(jié)合在單抗上的Human MCP-3 結(jié)合而形成免疫復(fù)合物，游離的成分被洗去。加入顯色底物，若反應(yīng)孔中有Human MCP-3 ，辣根過氧化物酶會使無色的顯色劑現(xiàn)藍色，加終止液變黃。在450 nm處測OD值，Human MCP-3 濃度與OD450值之間呈正比，可通過繪制標準曲線求出標本中Human MCP-3 的濃度。
本產(chǎn)品僅供科研使用、不用于臨床診斷
產(chǎn)品性能
組分
| 名稱 | 48T | 96T |
|---|---|---|
| 抗體預(yù)包被酶標板 | 8×6 | 8×12 |
| 凍干標準品 | 6 ng/支×2 支 | 6 ng/支×3 支 |
| 標準品&標本通用稀釋液 | 12 ml×1 瓶 | 20 ml×1瓶 |
| 濃縮生物素化抗體 | 1 支（規(guī)格見標簽） | 1 支（規(guī)格見標簽） |
| 生物素化抗體稀釋液 | 10 ml×1 瓶 | 16 ml×1 瓶 |
| 濃縮酶結(jié)合物 | 1 支（規(guī)格見標簽） | 1 支（規(guī)格見標簽） |
| 酶結(jié)合物稀釋液 | 10 ml×1 瓶 | 16 ml×1 瓶 |
| 濃縮洗滌液20× | 25 ml×1 瓶 | 50 ml×1 瓶 |
| 顯色底物（TMB） | 6 ml×1 瓶 | |
| 反應(yīng)終止液 | 6 ml×1 瓶 | 12 ml×1 瓶 |
| 封板膠紙 | 3張 | 6張 |
| 產(chǎn)品說明書 | 1份 | 1份 |
運輸溫度
冰袋存放說明/保質(zhì)期
| 未開封完整試劑盒 | 4℃，請在保質(zhì)期內(nèi)使用 | |
|---|---|---|
| 已開封試劑盒 | 抗體包被板條 | 未用完的板條放回帶拉鏈鋁箔袋封口 |
| 標準品 | 負20℃可儲存 6 個月左右，稀釋后即用即棄 | |
| 濃縮生物素化抗體 | 4℃可儲存 1 個月左右，稀釋后即用即棄 | |
| 濃縮酶結(jié)合物（避光） | ||
| 標準品&標本通用稀釋液 | 4℃可儲存 1 個月左右 | |
| 生物素化抗體稀釋液 | ||
| 酶結(jié)合物稀釋液 | ||
| 顯色底物（避光） | ||
| 反應(yīng)終止液 | ||
| 濃縮洗滌液20× |
凍干標準品推薦于-20℃保存；若條件不足，也可保存于4℃。
已開封試劑盒效期特指試劑開蓋后效期，如果僅拿出標準品置于-20℃，其他組分未啟用，效期同未開封完整試劑盒。
文件下載
實驗所需自備器材
1. 酶標儀(450 nm波長濾光片)。 2. 進口品牌高精度加液器及一次性吸頭：0.5-10 ul, 2-20 ul, 20-200ul, 200-1000 ul。 3. 37 ℃恒溫箱, 雙蒸水或去離子水，坐標紙等。相關(guān)數(shù)據(jù)
標準曲線
| Dose（ng/ml） | Raw Data | Average | Corrected | |
|---|---|---|---|---|
| 0 |
0.082 |
0.083 | 0.083 | |
| 0.16 | 0.130 | 0.126 | 0.128 | 0.046 |
| 0.31 | 0.191 | 0.187 | 0.189 | 0.107 |
| 0.63 | 0.285 | 0.282 | 0.284 | 0.201 |
| 1.25 | 0.451 | 0.447 | 0.449 | 0.367 |
| 2.5 | 0.752 | 0.750 | 0.751 | 0.699 |
| 5 | 1.323 | 1.319 | 1.321 | 1.239 |
| 10 | 2.308 | 2.299 | 2.304 | 2.221 |
注意：本圖僅供參考，應(yīng)以同次試驗標準品所繪標準曲線計算標本中人MCP-3的含量。
重復(fù)性
板內(nèi)，板間變異系數(shù)均<10%。
| 板內(nèi)重復(fù)性 | 板間重復(fù)性 | |||||
|---|---|---|---|---|---|---|
| 樣本 | 1 | 2 | 3 | 1 | 2 | 3 |
| 重復(fù)次數(shù) | 16 | 16 | 16 | 8 | 8 | 8 |
| 平均值（ng/ml） | 8.60 | 3.11 | 0.87 | 6.40 | 2.75 | 0.56 |
| 標準差 | 0.65 | 0.23 | 0.07 | 0.49 | 0.22 | 0.04 |
| 變異系數(shù)（%） | 7.60 | 7.40 | 8.00 | 7.70 | 8.10 | 7.90 |
科研工具箱
別稱
IC; MARC; MCP3; NC28; CCL7; SCYA6; SCYA7
基因ID
Gene ID: 6354
功能
單核細胞趨化蛋白-3(MCP-3)，也稱為 CCL7，最初是從受刺激的 MG-63 人骨肉瘤細胞中純化獲得，是單核/巨噬細胞強有力的趨化因子，參與多種炎性疾病的發(fā)展。MCP-3 基因位于 17 號染色體上CC 趨化因子基因簇內(nèi)，其相應(yīng)的 cDNA 編碼 99 個氨基酸前體蛋白。該前體蛋白含有 23 個氨基酸的信號序列，切割后產(chǎn)生含有 76 個氨基酸的 MCP-3 成熟趨化因子。非糖基化 MCP-3 的預(yù)測分子量約為 9KDa，但不同位置的糖基化（N-和 O-糖基化）可導(dǎo)致其分子量相差11KDa。與大部分趨化因子不同，MCP-3 不受二肽基肽酶 IV 裂解和失活的影響，可經(jīng) MMP-2 加工，產(chǎn)生一個 71 個氨基酸大小的蛋白質(zhì)，結(jié)合其受體而失活。MCP-3 的 mRNA 在血小板中是組成型表達，可被單核細胞、成纖維細胞、內(nèi)皮細胞、氣道平滑肌細胞(ASMC)、THP-1 髓單核細胞白血病細胞，MG-63 骨肉瘤細胞和 U937 前腦細胞白血病細胞中的炎癥因子誘導(dǎo)產(chǎn)生。單核細胞中的 IL-4、IL-10 和 IL-13 以及 ASMC中的地塞米松抑制炎性細胞因子依賴性表達。MCP-3 通過與 CC 趨化因子受體 CCR1、CCR2A、CCR2B 和 CCR3 結(jié)合而發(fā)揮其功能。這種廣泛的受體識別也正是其可以影響多種類型細胞功能的原因。MCP-3 主要引起單核/巨噬細胞在炎癥部位持續(xù)聚集，并激活單核/巨噬細胞發(fā)揮其吞噬病原體和抗原提呈作用。同時 MCP-3 對淋巴細胞、自然殺傷細胞(NK)、樹突狀細胞(DC)和嗜堿性細胞等也具有一定的趨化活性,誘導(dǎo)這些炎癥細胞向炎癥區(qū)域聚集，引發(fā)一連串的炎癥反應(yīng)。鑒于 MCP-3 能夠激活多種細胞參與炎癥反應(yīng)，目前 MCP-3在炎癥、腫瘤等領(lǐng)域成為熱點研究。近年來，國外醫(yī)學(xué)研究從各個學(xué)科領(lǐng)域的不同炎癥疾病中發(fā)現(xiàn) MCP-3 與多種慢性炎癥疾病的發(fā)生發(fā)展有關(guān)，病理狀態(tài)下 MCP-3 的異常表達，可導(dǎo)致過敏性疾病、動脈粥樣硬化、腸炎、宮頸癌、心肌炎等多種臨床疾病。
研究領(lǐng)域
免疫學(xué);
