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產(chǎn)品概述
QuantiCyto® Human CTLA-4/CD152 ELISA kit
Human
15.6pg/ml
31.25-2000pg/ml
雙抗體夾心法
比色法
血清、血漿、細胞培養(yǎng)上清液、灌洗液、尿液、羊水、腹水、腦脊液、胸腔積液、組織勻漿液等
100 μl/well
3.5h
用于體外定量檢測血清、血漿或其他適用樣品中天然及部分重組Human CTLA-4濃度
本試劑盒特異性識別天然和重組Human CTLA-4
與以下細胞因子無明顯交叉反應：Human B7-1, B7-2, IL-17, CD28. Mouse CTLA-4.
欣博盛 QuantiCyto? ELISA試劑盒采用雙抗體夾心法：抗Human CTLA-4單抗包被于酶標板上，標本和標準品中的Human CTLA-4會與單抗結合，游離的成分被洗去。加入生物素化的抗Human CTLA-4抗體和辣根過氧化物酶標記的親和素，生物素與親和素特異性結合；抗Human CTLA-4抗體與結合在單抗上的Human CTLA-4結合而形成免疫復合物，游離的成分被洗去。加入顯色底物，若反應孔中有Human CTLA-4，辣根過氧化物酶會使無色的顯色劑現(xiàn)藍色，加終止液變黃。在450 nm處測OD值，Human CTLA-4濃度與OD450值之間呈正比，可通過繪制標準曲線求出標本中Human CTLA-4的濃度。
本產(chǎn)品僅供科研使用、不用于臨床診斷
產(chǎn)品性能
組分
| 名稱 | 48T | 96T |
|---|---|---|
| 抗體預包被酶標板 | 8×6 | 8×12 |
| 凍干標準品 | 1 ng/支×2 支 | 1 ng/支×3 支 |
| 標準品&標本通用稀釋液 | 12 ml×1 瓶 | 20 ml×1瓶 |
| 濃縮生物素化抗體 | 1 支（規(guī)格見標簽） | 1 支（規(guī)格見標簽） |
| 生物素化抗體稀釋液 | 10 ml×1 瓶 | 16 ml×1 瓶 |
| 濃縮酶結合物 | 1 支（規(guī)格見標簽） | 1 支（規(guī)格見標簽） |
| 酶結合物稀釋液 | 10 ml×1 瓶 | 16 ml×1 瓶 |
| 濃縮洗滌液20× | 25 ml×1 瓶 | 50 ml×1 瓶 |
| 顯色底物（TMB） | 6 ml×1 瓶 | |
| 反應終止液 | 6 ml×1 瓶 | 12 ml×1 瓶 |
| 封板膠紙 | 3張 | 6張 |
| 產(chǎn)品說明書 | 1份 | 1份 |
運輸溫度
冰袋存放說明/保質(zhì)期
| 未開封完整試劑盒 | 4℃，請在保質(zhì)期內(nèi)使用 | |
|---|---|---|
| 已開封試劑盒 | 抗體包被板條 | 未用完的板條放回帶拉鏈鋁箔袋封口 |
| 標準品 | 負20℃可儲存 6 個月左右，稀釋后即用即棄 | |
| 濃縮生物素化抗體 | 4℃可儲存 1 個月左右，稀釋后即用即棄 | |
| 濃縮酶結合物（避光） | ||
| 標準品&標本通用稀釋液 | 4℃可儲存 1 個月左右 | |
| 生物素化抗體稀釋液 | ||
| 酶結合物稀釋液 | ||
| 顯色底物（避光） | ||
| 反應終止液 | ||
| 濃縮洗滌液20× |
凍干標準品推薦于-20℃保存；若條件不足，也可保存于4℃。
已開封試劑盒效期特指試劑開蓋后效期，如果僅拿出標準品置于-20℃，其他組分未啟用，效期同未開封完整試劑盒。
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實驗所需自備器材
1. 酶標儀(450 nm波長濾光片)。 2. 進口品牌高精度加液器及一次性吸頭：0.5-10 ul, 2-20 ul, 20-200ul, 200-1000 ul。 3. 37 ℃恒溫箱, 雙蒸水或去離子水，坐標紙等。相關數(shù)據(jù)
標準曲線
| Dose（pg/ml） | Raw Data | Average | Corrected | |
|---|---|---|---|---|
| 0 |
0.073 |
0.079 | 0.076 | |
| 31.25 | 0.111 | 0.117 | 0.114 | 0.038 |
| 62.5 | 0.131 | 0.139 | 0.135 | 0.059 |
| 125 | 0.169 | 0.177 | 0.173 | 0.097 |
| 250 | 0.295 | 0.301 | 0.298 | 0.222 |
| 500 | 0.548 | 0.578 | 0.563 | 0.487 |
| 1000 | 1.142 | 1.148 | 1.145 | 1.069 |
| 2000 | 2.298 | 2.304 | 2.301 | 2.225 |
注意：本圖僅供參考，應以同次試驗標準品所繪標準曲線計算標本中人CTLA-4的含量。
重復性
板內(nèi)，板間變異系數(shù)均<10%。
| 板內(nèi)重復性 | 板間重復性 | |||||
|---|---|---|---|---|---|---|
| 樣本 | 1 | 2 | 3 | 1 | 2 | 3 |
| 重復次數(shù) | 24 | 24 | 24 | 16 | 16 | 16 |
| 平均值（pg/ml） | 1547 | 986 | 124 | 1239 | 903 | 107 |
| 標準差 | 122.21 | 71.98 | 9.30 | 87.97 | 69.53 | 7.38 |
| 變異系數(shù)（%） | 7.9 | 7.3 | 7.5 | 7.1 | 7.7 | 6.9 |
科研工具箱
別稱
CD; GSE; GRD4; ALPS5; CD152; CTLA-4; IDDM12; CELIAC3
基因ID
Gene ID: 1493
功能
細胞毒性 T 淋巴細胞相關蛋白-4 (CTLA-4) ，也稱為 CD152，是一種 I 型跨膜 T 細胞抑制分子，屬于免疫球蛋白超家族成員。 CTLA-4 基因位于人類 2 號染色體的 q33-q34 帶和小鼠 1 號染色體的C 帶。人或小鼠 CTLA-4 cDNA 編碼 223 個氨基酸，包括 35 個氨基酸信號肽序列、126 個氨基酸胞外結構域(ECD)和一個 Ig 樣 V 型結構域、21 個氨基酸跨膜序列和 41 個氨基酸的胞質(zhì)序列。研究發(fā)現(xiàn)人CTLA-4 在胞外結構域是一種 41-43 kDa 的共價同型二聚體，分別與小鼠、大鼠和豬/牛/兔/貓/犬 CTLA-4 有 68%、71%和 83-86%的氨基酸序列同一性。 CTLA-4 和 CD28 具有高度同源性 ， 并且有相同的配體CD80(B7-1) 和 CD86(B7-2)，但它們的功能卻截然相反。CTLA-4是一種負性共刺激分子，負責向 T 細胞傳遞抑制信號，抑制 T 細胞的活性，從而促進免疫逃避。CTLA-4 的作用通過細胞內(nèi)在和細胞外在機制發(fā)生，細胞內(nèi)在機制包括抑制蛋白質(zhì)翻譯、募集磷酸酶、激活泛素連接酶、抑制細胞因子受體信號傳導和抑制 T 細胞膜脂質(zhì)結構域形成。細胞外部機制包括刺激抑制性吲哚胺(2，3)脫氧酶(IDO)的釋放，調(diào)節(jié)性 T 細胞功能的調(diào)節(jié)和 CD28 共刺激信號的競爭性抑制。CTLA-4 有超過 100 個與自身免疫和癌癥相關的單核苷酸多態(tài)性(SNPs)，CTLA-4 啟動子中的 SNPs 與多種癌癥相關，包括乳腺癌、宮頸癌、結腸直腸癌、頭頸癌、肝癌、黑色素瘤、非小細胞肺癌、腎癌等。CTLA-4 是重要的免疫檢查點，是目前腫瘤靶向免疫治療的熱點及方向。
研究領域
免疫學; 微生物學;干細胞與再生醫(yī)學與再生醫(yī)學
