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產(chǎn)品概述
QuantiCyto® Canine TNF-alpha ELISA kit
Canine
7.8pg/ml
15.6-1000pg/ml
雙抗體夾心法
比色法
血清、血漿、細胞培養(yǎng)上清液、灌洗液、尿液、羊水、腹水、腦脊液、胸腔積液、組織勻漿液等
100 μl/well
3.5h
用于體外定量檢測血清、血漿或其他適用樣品中天然及重組Canine TNF-α濃度
本試劑盒特異性識別天然和重組Canine TNF-α
與以下細胞因子等無明顯交叉反應(yīng)：Canine TNF-β, TNF RI, TNF RII, TGF-α, VEGF; Mouse TNF-α, TNF-β, TGF-α, VEGF; Rat TNF-α, TNF-β, TGF-α, HGF
欣博盛 QuantiCyto? ELISA試劑盒采用雙抗體夾心法：抗Canine TNF-α單抗包被于酶標板上，標本和標準品中的Canine TNF-α會與單抗結(jié)合，游離的成分被洗去。加入酶標抗體，抗Canine TNF-α抗體與結(jié)合在單抗上的Canine TNF-α結(jié)合而形成免疫復(fù)合物，游離的成分被洗去。加入顯色底物，若反應(yīng)孔中有Canine TNF-α，辣根過氧化物酶會使無色的顯色劑現(xiàn)藍色，加終止液變黃。在450 nm處測OD值，Canine TNF-α濃度與OD450值之間呈正比，可通過繪制標準曲線求出標本中Canine TNF-α的濃度。
本產(chǎn)品僅供科研使用、不用于臨床診斷。
產(chǎn)品性能
組分
| 名稱 | 48T | 96T |
|---|---|---|
| 抗體預(yù)包被酶標板 | 8×6 | 8×12 |
| 凍干標準品 | 0.6 ng/支×2 支 | 0.6 ng/支×3 支 |
| 標準品&標本通用稀釋液 | 12 ml×1 瓶 | 20 ml×1瓶 |
| 濃縮生物素化抗體 | 1 支（規(guī)格見標簽） | 1 支（規(guī)格見標簽） |
| 生物素化抗體稀釋液 | 10 ml×1 瓶 | 16 ml×1 瓶 |
| 濃縮酶結(jié)合物 | 1 支（規(guī)格見標簽） | 1 支（規(guī)格見標簽） |
| 酶結(jié)合物稀釋液 | 10 ml×1 瓶 | 16 ml×1 瓶 |
| 濃縮洗滌液20× | 25 ml×1 瓶 | 50 ml×1 瓶 |
| 顯色底物（TMB） | 6 ml×1 瓶 | 12 ml×1 瓶 |
| 反應(yīng)終止液 | 6 ml×1 瓶 | 12 ml×1 瓶 |
| 封板膠紙 | 3張 | 6張 |
| 產(chǎn)品說明書 | 1份 | 1份 |
運輸溫度
冰袋存放說明/保質(zhì)期
| 未開封完整試劑盒 | 4℃，請在保質(zhì)期內(nèi)使用 | |
|---|---|---|
| 已開封試劑盒 | 抗體包被板條 | 未用完的板條放回帶拉鏈鋁箔袋封口 |
| 標準品 | 負20℃可儲存 6 個月左右，稀釋后即用即棄 | |
| 濃縮生物素化抗體 | 4℃可儲存 1 個月左右，稀釋后即用即棄 | |
| 濃縮酶結(jié)合物（避光） | ||
| 標準品&標本通用稀釋液 | 4℃可儲存 1 個月左右 | |
| 生物素化抗體稀釋液 | ||
| 酶結(jié)合物稀釋液 | ||
| 顯色底物（避光） | ||
| 反應(yīng)終止液 | ||
| 濃縮洗滌液20× |
凍干標準品推薦于-20℃保存；若條件不足，也可保存于4℃。
已開封試劑盒效期特指試劑開蓋后效期，如果僅拿出標準品置于-20℃，其他組分未啟用，效期同未開封完整試劑盒。
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實驗所需自備器材
1. 酶標儀(450 nm波長濾光片)。 2. 進口品牌高精度加液器及一次性吸頭：0.5-10 ul, 2-20 ul, 20-200ul, 200-1000 ul。 3. 37 ℃恒溫箱, 雙蒸水或去離子水，坐標紙等。相關(guān)數(shù)據(jù)
標準曲線
| Dose（pg/ml） | Raw Data | Average | Corrected | |
|---|---|---|---|---|
| 0 | 0.062 | 0.064 | 0.063 | |
| 15.6 | 0.112 | 0.118 | 0.115 | 0.052 |
| 31.3 | 0.165 | 0.173 | 0.169 | 0.106 |
| 62.5 | 0.257 | 0.271 | 0.264 | 0.201 |
| 125 | 0.489 | 0.499 | 0.494 | 0.431 |
| 250 | 0.886 | 0.892 | 0.889 | 0.826 |
| 500 | 1.539 | 1.553 | 1.546 | 1.483 |
| 1000 | 2.622 | 2.638 | 2.630 | 2.567 |
注意：本圖僅供參考，應(yīng)以同次試驗標準品所繪標準曲線計算標本中犬TNF-α的含量。
重復(fù)性
板內(nèi)，板間變異系數(shù)均<10%。
| 板內(nèi)重復(fù)性 | 板間重復(fù)性 | |||||
|---|---|---|---|---|---|---|
| 樣本 | 1 | 2 | 3 | 1 | 2 | 3 |
| 重復(fù)次數(shù) | 16 | 16 | 16 | 12 | 12 | 12 |
| 平均值（pg/ml） | 835.1 | 411.7 | 100.4 | 807.3 | 400.8 | 99.1 |
| 標準差 | 68.48 | 31.70 | 7.33 | 63.78 | 28.86 | 7.73 |
| 變異系數(shù)（%） | 8.2 | 7.7 | 7.3 | 7.9 | 7.2 | 7.8 |
科研工具箱
別稱
DIF; TNFA; TNFSF2; TNLG1F; TNF-alpha
基因ID
Gene ID: 403922
功能
腫瘤壞死因子α (Tumor necrosis factor alpha, TNF-α)，又稱惡病質(zhì)素（cachectin），是 TNF 超家族的原型配體。TNF-α是一種多效性分子，在炎癥、細胞凋亡和免疫系統(tǒng)發(fā)育中發(fā)揮中心作用。TNF-α是由多種免疫和上皮細胞類型產(chǎn)生的。人 TNF-α由一個 35 氨基酸(aa)胞質(zhì)結(jié)構(gòu)域，一個 21 氨基酸跨膜段和一個 177 氨基酸胞外結(jié)構(gòu)域(ECD)組成。在 ECD 中，人類 TNF-α與恒河猴有 97%的 aa 序列同源性，與牛、犬、棉鼠、馬、貓、小鼠、豬和大鼠 TNF-α有 71% - 92%的同源性。26kda 的 II 型跨膜蛋白在細胞內(nèi)組裝，形成非共價連接的同型三聚體。這種復(fù)合物的連接誘導(dǎo)反向信號，促進淋巴細胞共刺激，但減少單核細胞的反應(yīng)性。TACE/ADAM17 切割膜結(jié)合 TNF-α釋放出 55kda 可溶性 TNF-α三聚體形式, TNF-α三聚體結(jié)合 TNF- RI和 TNF- RII 進行下游信號傳導(dǎo)。TNF-α通過控制細胞凋亡調(diào)控淋巴組織的發(fā)育。TNF-α通過誘導(dǎo)血管內(nèi)皮細胞和巨噬細胞的活化來促進炎癥反應(yīng)。TNF-α通過影響胰島素抵抗和脂肪酸代謝而促進 II 型糖尿病的發(fā)展。
研究領(lǐng)域
免疫學(xué);信號轉(zhuǎn)導(dǎo);干細胞與再生醫(yī)學(xué);微生物學(xué);癌癥生物學(xué);心血管生物學(xué);神經(jīng)科學(xué);代謝生物學(xué);
