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產(chǎn)品概述
QuantiCyto® Human Siglec-5/Siglec-14 ELISA kit
Human
23.5 pg/ml
47-3000 pg/ml
雙抗體夾心法
比色法
血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、灌洗液、尿液、羊水、腹水、腦脊液、胸腔積液、組織勻漿液等
100 μl/well
3.5h
用于體外定量檢測(cè)血清、血漿或其他適用樣品中天然及重組Human Siglec-5/Siglec-14濃度
本試劑盒特異性識(shí)別天然和重組人Siglec-5/Siglce-14。
與Siglec-3/Fc Chimera、Siglec-7/Fc Chimera、Siglec-9/Fc Chimera無明顯交叉反應(yīng)。
欣博盛QuantiCyto? ELISA試劑盒采用雙抗體夾心法 ： 抗人Siglec-5/Siglce-14單抗包被于酶標(biāo)板上，標(biāo)本和標(biāo)準(zhǔn)品中的人Siglec-5/Siglce-14會(huì)與單抗結(jié)合，游離的成分被洗去。加入生物素化的抗人Siglec-5/Siglce-14抗體和辣根過氧化物酶標(biāo)記的親和素，生物素與親和素特異性結(jié)合；抗人Siglec-5/Siglce-14抗體與結(jié)合在單抗上的人Siglec-5/Siglce-14結(jié)合而形成免疫復(fù)合物，游離的成分被洗去。加入顯色底物，若反應(yīng)孔中有人Siglec-5/Siglce-14，辣根過氧化物酶會(huì)使無色的顯色劑現(xiàn)藍(lán)色，加終止液變黃。在450 nm處測(cè)OD值，人Siglec-5/Siglce-14濃度與OD450值之間呈正比，可通過繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線求出標(biāo)本中人Siglec-5/Siglce-14的濃度。
本產(chǎn)品僅供科研使用、不用于臨床診斷
產(chǎn)品性能
組分
| 名稱 | 48T | 96T |
|---|---|---|
| 抗體預(yù)包被酶標(biāo)板 | 8×6 | 8×12 |
| 凍干標(biāo)準(zhǔn)品 | 3 ng/支×2 支 | 3 ng/支×3 支 |
| 標(biāo)準(zhǔn)品&標(biāo)本通用稀釋液 | 12 ml×1 瓶 | 20 ml×1瓶 |
| 濃縮生物素化抗體 | 1 支（規(guī)格見標(biāo)簽） | 1 支（規(guī)格見標(biāo)簽） |
| 生物素化抗體稀釋液 | 10 ml×1 瓶 | 16 ml×1 瓶 |
| 濃縮酶結(jié)合物 | 1 支（規(guī)格見標(biāo)簽） | 1 支（規(guī)格見標(biāo)簽） |
| 酶結(jié)合物稀釋液 | 10 ml×1 瓶 | 16 ml×1 瓶 |
| 濃縮洗滌液20× | 25 ml×1 瓶 | 50 ml×1 瓶 |
| 顯色底物（TMB） | 6 ml×1 瓶 | 12 ml×1 瓶 |
| 反應(yīng)終止液 | 6 ml×1 瓶 | 12 ml×1 瓶 |
| 封板膠紙 | 3張 | 6張 |
| 產(chǎn)品說明書 | 1份 | 1份 |
運(yùn)輸溫度
冰袋存放說明/保質(zhì)期
| 未開封完整試劑盒 | 4℃，請(qǐng)?jiān)诒Ｙ|(zhì)期內(nèi)使用 | |
|---|---|---|
| 已開封試劑盒 | 抗體包被板條 | 未用完的板條放回帶拉鏈鋁箔袋封口 |
| 標(biāo)準(zhǔn)品 | 負(fù)20℃可儲(chǔ)存 6 個(gè)月左右，稀釋后即用即棄 | |
| 濃縮生物素化抗體 | 4℃可儲(chǔ)存 1 個(gè)月左右，稀釋后即用即棄 | |
| 濃縮酶結(jié)合物（避光） | ||
| 體稀釋液 | 4℃可儲(chǔ)存 1 個(gè)月左右 | |
| 生物素化抗體稀釋液 | ||
| 酶結(jié)合物稀釋液 | ||
| 顯色底物（避光） | ||
| 反應(yīng)終止液 | ||
| 濃縮洗滌液20× |
已開封試劑盒效期特指試劑開蓋后效期，如果僅拿出標(biāo)準(zhǔn)品置于-20℃，其他組分未啟用，效期同未開封完整試劑盒。
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實(shí)驗(yàn)所需自備器材
1. 酶標(biāo)儀(450 nm波長(zhǎng)濾光片)。 2. 進(jìn)口品牌高精度加液器及一次性吸頭：0.5-10 ul, 2-20 ul, 20-200ul, 200-1000 ul。 3. 37 ℃恒溫箱, 雙蒸水或去離子水，坐標(biāo)紙等。
相關(guān)數(shù)據(jù)
標(biāo)準(zhǔn)曲線
| Dose（pg/ml） | Raw Data | Average | Corrected | |
|---|---|---|---|---|
| 0 | 0.064 | 0.065 | 0.065 | |
| 46.9 | 0.110 | 0.114 | 0.112 | 0.048 |
| 93.8 | 0.150 | 0.157 | 0.154 | 0.089 |
| 187.5 | 0.247 | 0.255 | 0.251 | 0.187 |
| 375 | 0.442 | 0.438 | 0.440 | 0.376 |
| 750 | 0.803 | 0.800 | 0.802 | 0.737 |
| 1500 | 1.449 | 1.462 | 1.456 | 1.391 |
| 3000 | 2.426 | 2.438 | 2.432 | 2.368 |
注意：本圖僅供參考，應(yīng)以同次試驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)品所繪標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算標(biāo)本中人Siglec-5/Siglec-14的含量。
重復(fù)性
板內(nèi)，板間變異系數(shù)均<10%。
| 板內(nèi)重復(fù)性 | 板間重復(fù)性 | |||||
|---|---|---|---|---|---|---|
| 樣本 | 1 | 2 | 3 | 1 | 2 | 3 |
| 重復(fù)次數(shù) | 10 | 10 | 10 | 10 | 10 | 10 |
| 平均值（pg/ml） | 1752.3 | 553.1 | 100.8 | 1688.5 | 489.3 | 88.9 |
| 標(biāo)準(zhǔn)差 | 138.4 | 42.6 | 7.6 | 135.1 | 38.2 | 6.8 |
| 變異系數(shù)（%） | 7.9 | 7.7 | 7.5 | 8.0 | 7.8 | 7.6 |
科研工具箱
別稱
① SIGLEC5, CD170, CD33L2, OB-BP2, OBBP2, SIGLEC-5, sialic acid binding Ig like lectin 5② SIGLEC14, sialic acid binding Ig like lectin 14
基因ID
External Ids for SIGLEC5 Gene：HGNC: 10874 NCBI Gene: 8778 Ensembl: ENSG00000268500 OMIM?: 604200 UniProtKB/Swiss-Prot: O15389； External Ids for SIGLEC14 Gene：HGNC: 32926 NCBI Gene: 100049587 Ensembl: ENSG00000254415 OMIM?: 618132 UniProtKB/Swiss-Prot: Q0
功能
唾液酸結(jié)合免疫球蛋白型凝集素（Sialic acid-binding immunoglobulin-type lectins, Siglecs）是結(jié)合唾液酸的細(xì)胞表面蛋白。它們主要存在于免疫細(xì)胞表面，是I型（Ig型）凝集素的一個(gè)子集。在哺乳動(dòng)物中有14種不同的Siglecs，根據(jù)細(xì)胞表面受體-配體相互作用提供一系列不同的功能。這14種Siglecs主要分為兩類：一類在哺乳動(dòng)物中高度保守，包括Siglec-1/CD169/Sialoadhesin、Siglec-2/CD22、Siglec-4/髓鞘相關(guān)糖蛋白 （myelin-associated glycoprotein, MAG)和 Siglec-15；另一類結(jié)構(gòu)與 CD33高度相似，因此統(tǒng)稱為“CD33相關(guān)Siglecs”，包括Siglec-3/CD33、Siglec-5、Siglec-6、Siglec-7、Siglec-8、Siglec-9、Siglec-11、Siglec-XⅡ、Siglec-14、Siglec-16。其他如Siglec-8 和 Siglec-9 在小鼠和大鼠中具有同源物（分別為Siglec-F和Siglec-E）。 Siglecs家族的主要功能是與含有唾液酸的糖結(jié)合，這些受體-聚糖相互作用可參與細(xì)胞粘附、細(xì)胞信號(hào)傳導(dǎo)等過程中。大多數(shù)的Siglecs因其細(xì)胞內(nèi)免疫受體酪氨酸基抑制基序（Immunoreceptor tyrosine-based inhibitory motif, ITIM）結(jié)構(gòu)域在細(xì)胞信號(hào)中發(fā)揮抑制作用，抑制免疫細(xì)胞的激活。結(jié)合配體后，Siglecs通過其ITIM結(jié)構(gòu)域招募抑制蛋白（如SHP磷酸酶），導(dǎo)致細(xì)胞蛋白去磷酸化，從而下調(diào)激活的信號(hào)通路。 Siglec-14在其跨膜區(qū)域含有精氨酸殘基，該殘基與含有ITAM的銜接蛋白DNAX激活蛋白DAP10和DAP12結(jié)合。當(dāng)Siglec-14與其配體結(jié)合時(shí)，Siglec-14通過DAP10和DAP12蛋白激活細(xì)胞信號(hào)通路。這些蛋白質(zhì)上調(diào)涉及許多細(xì)胞蛋白的磷酸化級(jí)聯(lián)反應(yīng)，導(dǎo)致細(xì)胞活化。Siglec-14似乎與Siglec-5共定位，后者抑制細(xì)胞信號(hào)通路，二者在免疫細(xì)胞中協(xié)調(diào)相反功能。
研究領(lǐng)域
免疫學(xué);信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo);
