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產(chǎn)品概述
QuantiCyto® Human TNF-α ELISA kit (High Sensitivity)
Human
1.95pg/ml
3.9-250pg/ml
雙抗體夾心法
比色法
血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、灌洗液、尿液、羊水、腹水、腦脊液、胸腔積液、組織勻漿液等
100 μl/well
3.5h
用于體外定量檢測(cè)血清、血漿或其他適用樣品中天然及重組Human TNF-α濃度
本試劑盒特異性識(shí)別天然和重組人TNF-α
與以下細(xì)胞因子等無(wú)明顯交叉反應(yīng)：Human：IL-2，IL-4，IL-5，IL-6，IL-8，IL-10，IL-12，TNF RI，TNF RII，TNF-β；Mouse ：IL-2，IL-4，IL-6，IL-10，TNF-α，TNF RI，TNF RII；Rat：TNF-α
欣博盛 QuantiCyto? ELISA試劑盒采用雙抗體夾心法：抗人TNF-α單抗包被于酶標(biāo)板上，標(biāo)本和標(biāo)準(zhǔn)品中的人TNF-α?xí)c單抗結(jié)合，游離的成分被洗去。加入生物素化的抗人TNF-α抗體和辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記的親和素，生物素與親和素特異性結(jié)合；抗人TNF-α抗體與結(jié)合在單抗上的人TNF-α結(jié)合而形成免疫復(fù)合物，游離的成分被洗去。加入顯色底物，若反應(yīng)孔中有人TNF-α，辣根過(guò)氧化物酶會(huì)使無(wú)色的顯色劑現(xiàn)藍(lán)色，加終止液變黃。在450 nm處測(cè)OD值，人TNF-α濃度與 OD450值之間呈正比，可通過(guò)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線求出標(biāo)本中人TNF-α的濃度。
本產(chǎn)品僅供科研使用、不用于臨床診斷。
產(chǎn)品性能
組分
| 名稱 | 48T | 96T |
|---|---|---|
| 抗體預(yù)包被酶標(biāo)板 | 8×6 | 8×12 |
| 凍干標(biāo)準(zhǔn)品 | 1 ng/支×2 支 | 1 ng/支×3 支 |
| 標(biāo)準(zhǔn)品&標(biāo)本通用稀釋液 | 12 ml×1 瓶 | 20 ml×1瓶 |
| 濃縮生物素化抗體 | 1 支（規(guī)格見(jiàn)標(biāo)簽） | 1 支（規(guī)格見(jiàn)標(biāo)簽） |
| 生物素化抗體稀釋液 | 10 ml×1 瓶 | 16 ml×1 瓶 |
| 濃縮酶結(jié)合物 | 1 支（規(guī)格見(jiàn)標(biāo)簽） | 1 支（規(guī)格見(jiàn)標(biāo)簽） |
| 酶結(jié)合物稀釋液 | 10 ml×1 瓶 | 16 ml×1 瓶 |
| 濃縮洗滌液20× | 25 ml×1 瓶 | 50 ml×1 瓶 |
| 顯色底物（TMB） | 6 ml×1 瓶 | 12 ml×1 瓶 |
| 反應(yīng)終止液 | 6 ml×1 瓶 | 12 ml×1 瓶 |
| 封板膠紙 | 3張 | 6張 |
| 產(chǎn)品說(shuō)明書(shū) | 1份 | 1份 |
運(yùn)輸溫度
冰袋存放說(shuō)明/保質(zhì)期
| 未開(kāi)封完整試劑盒 | 4℃，請(qǐng)?jiān)诒Ｙ|(zhì)期內(nèi)使用 | |
|---|---|---|
| 已開(kāi)封試劑盒 | 抗體包被板條 | 未用完的板條放回帶拉鏈鋁箔袋封口 |
| 標(biāo)準(zhǔn)品 | 負(fù)20℃可儲(chǔ)存 6 個(gè)月左右，稀釋后即用即棄 | |
| 濃縮生物素化抗體 | 4℃可儲(chǔ)存 1 個(gè)月左右，稀釋后即用即棄 | |
| 濃縮酶結(jié)合物（避光） | ||
| 標(biāo)準(zhǔn)品&標(biāo)本通用稀釋液 | 4℃可儲(chǔ)存 1 個(gè)月左右 | |
| 生物素化抗體稀釋液 | ||
| 酶結(jié)合物稀釋液 | ||
| 顯色底物（避光） | ||
| 反應(yīng)終止液 | ||
| 濃縮洗滌液20× |
凍干標(biāo)準(zhǔn)品推薦于-20℃保存；若條件不足，也可保存于4℃。
已開(kāi)封試劑盒效期特指試劑開(kāi)蓋后效期，如果僅拿出標(biāo)準(zhǔn)品置于-20℃，其他組分未啟用，效期同未開(kāi)封完整試劑盒。
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實(shí)驗(yàn)所需自備器材
1. 酶標(biāo)儀(450 nm波長(zhǎng)濾光片)。 2. 進(jìn)口品牌高精度加液器及一次性吸頭：0.5-10 ul, 2-20 ul, 20-200ul, 200-1000 ul。 3. 37 ℃恒溫箱, 雙蒸水或去離子水，坐標(biāo)紙等。相關(guān)數(shù)據(jù)
標(biāo)準(zhǔn)曲線
| Dose（pg/ml） | Raw Data | Average | Corrected | |
|---|---|---|---|---|
| 0 | 0.066 | 0.067 | 0.067 | |
| 3.9 | 0.113 | 0.111 | 0.112 | 0.046 |
| 7.8 | 0.185 | 0.183 | 0.184 | 0.118 |
| 15.6 | 0.300 | 0.296 | 0.298 | 0.232 |
| 31.3 | 0.513 | 0.507 | 0.510 | 0.444 |
| 62.5 | 0.889 | 0.881 | 0.885 | 0.819 |
| 125 | 1.566 | 1.562 | 1.564 | 1.498 |
| 250 | 2.614 | 2.607 | 2.611 | 2.544 |
注意：本圖僅供參考，應(yīng)以同次試驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)品所繪標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算標(biāo)本中人TNF-α的含量。
重復(fù)性
板內(nèi)，板間變異系數(shù)均<10%。
| 板內(nèi)重復(fù)性 | 板間重復(fù)性 | |||||
|---|---|---|---|---|---|---|
| 樣本 | 1 | 2 | 3 | 1 | 2 | 3 |
| 重復(fù)次數(shù) | 10 | 10 | 10 | 8 | 8 | 8 |
| 平均值（pg/ml） | 188.6 | 64.3 | 10.1 | 201.6 | 88.3 | 7.7 |
| 標(biāo)準(zhǔn)差 | 14.3 | 4.8 | 0.8 | 15.9 | 6.8 | 0.6 |
| 變異系數(shù)（%） | 7.6 | 7.4 | 8.0 | 7.9 | 7.7 | 8.1 |
科研工具箱
別稱
DIF; TNFA; TNFSF2; TNLG1F
基因ID
Gene ID: 7124
功能
腫瘤壞死因子α(tumor necrosis factor α , TNF-α)是一種具有多功能的細(xì)胞因子，在炎癥反應(yīng)、細(xì)胞免疫、細(xì)胞凋亡和脂質(zhì)代謝中發(fā)揮重要作用。人 TNF-α前體由 233 個(gè)氨基酸組成(26 kDa)，其中包含由76 個(gè)氨基酸殘基組成的信號(hào)肽，在 TNF 轉(zhuǎn)化酶 TACE 的作用下，切除信號(hào)肽，形成成熟的 157 個(gè)氨基酸殘基的 TNF-α(17 kDa)。在胞外結(jié)構(gòu)域中，人 TNF-α與恒河猴的氨基酸序列具有 97%的同一性，與牛、犬、棉鼠、馬、貓、小鼠、豬和大鼠 TNF-α序列具有 71%-92%的同一性。TNF-α來(lái)源極廣泛，體內(nèi)多種細(xì)胞如單核細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞和角質(zhì)細(xì)胞等均可產(chǎn)生和釋放 TNF-α。TNF 受體有 2 種，I 型(TNFR1)分子量為 55 kD，Ⅱ型(TNFR2)為 75 kD，在多種細(xì)胞中表達(dá)，介導(dǎo)細(xì)胞凋亡的主要是 TNFR1。TNF-α以三聚體的形式與靶細(xì)胞上 3 分子 TNFR 結(jié)合而使受體激活。 TNF-α具有廣泛的生物學(xué)活性，可以殺傷或抑制腫瘤細(xì)胞，誘導(dǎo)正常細(xì)胞增殖分化，抗感染，促進(jìn) IL-1、IL-2 和 IL-6 的產(chǎn)生和分泌，誘發(fā)炎癥反應(yīng)，激活嗜中性粒細(xì)胞，調(diào)節(jié) MHCⅡ類抗原的表達(dá)，提高中性粒細(xì)胞的吞噬能力。TNF-α也參與許多病理過(guò)程，包括哮喘、克羅恩病、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、神經(jīng)病理性疼痛、肥胖、2 型糖尿病、感染性休克、自身免疫和癌癥等。
研究領(lǐng)域
免疫學(xué);信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo);干細(xì)胞與再生醫(yī)學(xué);微生物學(xué);癌癥生物學(xué);心血管生物學(xué);神經(jīng)科學(xué);代謝生物學(xué);
